IVF embryoutvikling – innsikt i embryologilab

Infertilitetsreise i IVF-laboratorium

Det er så mye omsorg for egg, sæd og embryo som finner sted i IVF-laboratoriet. Hver dag i prosessen har bestemte mål og oppgaver som utføres.

24 sekunders embryoutvikling i IVF-lab som kan endre menneskers liv.

Hva er det i videoen ovenfor? Med utviklingen av ny teknologi, inkludert embryoovervåkningssystemer, har embryoologer nå et vindu for å se det utviklende embryoet uten å forstyrre det sensitive kulturmiljøet. Den vedlagte video ovenfor viser utviklingen av embryoet fra enkeltcellestadiet til det utvidede blastocyst-stadiet. embryoet kan sees spalte først til det to celletrinnet, multipliseres til det fire og åtte celletrinnet og deretter danne den senere faset morula. Etter morula-stadiet oppstår blastulering og embryoet utvikles til en fullt utvidet blastocyst som er klar for overføring eller kryopreservasjon. Forskere analyserer fortsatt disse dataene for å bestemme hvilken informasjon fra opptakstidene kan være klinisk signifikant og at informasjonen vil bidra til å forutsi implantasjonspotensialet til embryoene. Husk at 24 sekunder i videoen betyr 5 dagers embryokultur og mange mennesker involvert i prosessen. Så la oss se på hvordan det virkelig fungerer i et IVF Lab og hva er rollen som embryolog i IVF-behandlingsprosessen. La oss begynne fra begynnelsen.

---

Infertilitetsreisen kan ofte begynne med å lære et nytt språk. ICSI, AZH, PGS IVF, IUI og andre forkortelser kan føle seg overveldende! Jeg ser at mange par prøver å få kontroll over prosessen og navigere sin reise med en komplisert og noen ganger idiopatisk diagnose. Ofte er det andre infertilitetsbehandlinger startet i den kliniske innstillingen før IVF til og med anbefales. Som et par som sliter med å bli gravide, kan det føles som om prosessen tar evig; venter på avtaler, blodarbeid og behandlingsplaner. Men når bokstavene „IVF” er utgitt fra en kliniker, akselererer behandlingsprosessen inkludert testing, medisinadministrasjon og klinisk overvåking.

Mange pasienter vet ikke hvilken viktig rolle embryologien spiller under behandlingsprosessen. Ikke bare er det ikke mye informasjon om IVF Laboratoriet, men feltet embryologi i seg selv er ikke mye snakket om.

Embryologi laboratorium og kvalitet

Et embryologilaboratorium er typisk rettet av en person med strenge kvalifikasjoner inkludert en PhD eller MD. Laboratoriet direktøren jobber svært tett med klinikerne og medisinske direktører for å gi deg kvalitet omsorg ved hjelp av embryologer og laboratorie fagfolk. Hver stat regulerer lisenskravene til laboratorium fagfolk og disse kvalifikasjonene er gjennomgått av akkrediteringsbyråer. Et embryologilaboratorium er designet for å gi et spesialisert cellekulturmiljø. Hele laboratoriet er utformet for å etterlikne det fallopiske rør og livmormiljø. Luftkvalitet, miljø, materialer og sikkerhetsprotokoller som brukes er svært spesialisert. Luftkvalitet er en meget viktig komponent i et vellykket IVF/embryologi-laboratorium. Mange labs har et utpekt ventilasjonssystem med HEPA-filtre og karbonfilter for å sikre at bare reneste luft som er mulig er inne i laboratoriet. Byforurensning, rengjøringsprodukter, laminat benkeplater og teppe sjampo er alle eksempler på potensielt giftige kilder som hemmer embryoutvikling. I mitt laboratorium bruker vi et utpekt ventilasjonssystem for laboratoriet og omliggende oocyte retrieval og embryooverføring suiter. Det har 4 separate filtersystemer og det maksimale antall friske luftutvekslinger. Vår eier og kliniker valgte til og med vår plassering basert på vindmønstre som sikret mindre forurenset luft fra Nord- Minnesota i stedet for luft fra de mer trafikkerte, høyt befolkede indre byområder. Du kan være interessert i

• Hvordan forberede IVF Embryo overføring, før og etterpå
• Hva å gjøre og hva ikke å gjøre etter Embryo overføring?
• IVF med donoregg suksessrates – Sannhetens klinikker ikke fortelle deg

Miljøet i et IVF-laboratorium

Miljøet i IVF/embryologilaboratoriet styres også tett. Forskning har vist at embryoer kan være sensitive for lyset, da intet lys når dem når de vokser inne i kroppen, derfor laboratoriet sannsynligvis har lite eller ingen naturlig lys, er varmt og svært fuktig. embryoene må transporteres rundt laboratoriet under ulike prosedyrer, så vi holder temperaturen varm for å hindre rask avkjøling av rettene de bæres i, og holder alt utstyret og arbeidsflatene ved 37 C. Vi kontrollerer også fuktigheten om mulig for å hindre fordamping av våre medier, noe som vil føre til en endring i osmolaritet og påvirke embryoenes tilgang til forskjellige proteiner og sukker som trengs for å vokse. Embryologer bruker ofte skrubber, hårdekker, hansker og masker for å beskytte oss mot biologiske stoffer og for å hindre forurensning av kultursystemene. Det er en svært fin balanse mellom aseptisk kultur og nurturativ kultur. Over bruk av rengjøringsprodukter i forsøk på å være så aseptisk som mulig kan skape giftig luft og feil type hansker kan være skadelig. Byggematerialer i utforming og bygging av laboratoriet kan også påvirke celleveksten, og av gassing av laminat, gulv og skap kan påvirke luftkvalitet. Et laboratorium som tester og anser alle mulige kilder til luftforurensning vil ha høyere suksess.

Embryo kultur

Embryo kultur og gamete prosessering krever bruk av forbruksbare produkter som samlebeholdere, kulturretter og sentrifuge rør som vanligvis produseres ved hjelp av plast. Mange laboratorier bruker en bioanalyse for å teste disse materialene og for å bekrefte at de ikke har effekt på cellekulturen. Labs har også muligheten til å kjøpe materialer som har blitt pre-testet og bevist trygg. Hvert parti (eller boks) må verifiseres for å sikre at ingen variasjon i produktproduksjon oppdages. På denne måten kan vi stole på at enhver variasjon i celleadferd skyldes selve cellen, ikke på grunn av beholderen den bor i. For eksempel er vi spesielt opptatt av de sædinnsamlingsbeholdere. Det er derfor vi tilbyr samlingssett og hjemme Tupperware, film case eller reseptbelagt flaske er ikke brukbart. Hvis prøven din er bestemt på å være under de normale parametrene, ønsker vi å sørge for at beholderen den ble samlet i ikke påvirket testresultatene. Mediene vi bruker til å vokse og gi næring til spillene dine er også strengt regulert. Det er ofte formulert fra syntetisk humant fallopisk tubal væske. Substratene i media gir energi til oocytter, sæd og embryoer slik at de kan vokse og utvikle seg. De fleste typer medier trenger oppvarming og ekvivalens før bruk. Vi forbereder dine retter og rør dagen før for å sikre at det er optimalisert for celletypen. Miljøet cellene dyrkes i er annerledes enn romluft og temperatur. Dette betyr at vi må kontrollere kulturforholdene strengt for å sikre at det er like nært som det gjennomsnittlige livmor/fallopiske røret. CO2, O2 og temperatur måles hver dag for å sikre at systemer er sikre og optimale. Vi bruker mye tid på kvalitetskontroll og dokumentasjon hver dag. Etter at embryologene sørger for at miljøet og materialene er trygge, begynner arbeidet. Vi starter tidlig på morgenen, utfører kvalitetskontroll tiltak og begynner å forberede seg på dagen. Når du ser på en klinikkens hjemmeside vil du sørge for at laboratoriet er akkreditert og at klinikken har riktig bemanning. Gradkrav og bemanningsforhold er oppført i \”Revidert minstestandard for praksis som tilbyr assistert reproduktiv teknologi\”¹ ved CDC.

IVF laboratorium

Vi forbereder oss på dine spill i laboratoriet først administrativt. Vi mottar informasjon og bestillinger fra din kliniker om de forskjellige typer laboratoriebehandling dine spillere vil motta. Vi må vite om du bruker dine egne egg eller sæd (eller ved hjelp av donor egg eller sæd), koordinere hvor og når prøvene vil være tilgjengelige og hva befruktning, kultur, overføring, biopsi og frysealternativer klinikken har bestilt for deg. Dagen før innhentingsprosessen begynner vi med å forberede og fylle retter og rør. Dag 0 eller innhentingsdagen er dagen vårt arbeid med oocyttene begynner!

Embryo utvikling i IVF lab – 5 dager som kan endre menneskers liv

Egg retur dag – dag 0

Vi er involvert i egget ditt ved å lete etter og identifisere egg fra aspirert follikulært fluid. Etter å ha fått egget tilbake, hviler eggene. Avhengig av metoden din klinikker velger for befruktning, vil eggene bli behandlet for å fjerne sine cumulus celler for ICSI eller vasket og plassert i dråper for konvensjonell inseminasjon. Hvis ICSI er valgt og cumulus celler fjernes og eggene vil begynne en prosess der en liten liten nål brukes til å plukke opp og injisere den beste morfologisk formede, motil sæd i cytoplasmen av eggene. Morfologi er uttrykket som brukes til å vurdere eller beskrive formen på sædhodet. Jo mer normal/oval sædhodeformen er, jo høyere er sjansen for at atommaterialet inne i sædhodet også er normalt.

Jeg elsker alltid en \”det handler om utseendet\” vits her når jeg snakker med pasienter.

Sperm motilitet brukes til å vurdere levedyktigheten og er en indikator på at sæden er levende og i stand til å befrukte et egg. Hvis en pasient ikke har noen motil sæd, kan levedyktigheten fortsatt være identifiserbar, men prognosen din er redusert. Den typiske normale befruktningsgraden eller suksessen med ICSI er 75%. En viktig påminnelse for pasienter, ikke alle egg er like. Under denne ICSI prosessen er eggmorfologi også evaluert og bemerket. Selv om vi ikke kan se kjerne- eller DNA-materialet i egget, kan andre morfologiske faktorer som granularitet og brytningsorganer bli observert i noen eller alle egg og kommunisert til klinikerne. Embryologer kan ha innsikt basert på disse første vurderingene av dine spill som kan hjelpe klinikeren endre en behandlingsplan. Mens vi har lært mye om egg og sæd kvalitet og utvikling, er det fortsatt mye vi ennå ikke vet. Måten egg og sæd ser ut kan være en indikator på sin kvalitet, eller potensial for suksess, men det er gametes på begge sider av morfologispekteret som kan skape vakre babyer. Vi prøver å befrukte alt med de beste spillene vi har og gå derfra.

Noe jeg har delt mange ganger gjennom årene som har virket å koble til pasienter er dagligvarebutikk analogi. Når en person går til dagligvarebutikken og åpner en kartong av egg, ser de veldig lik og god ut. Dette er ikke tilfelle i et menneske dusin.

Selv i optimale donor egg tilfeller ser jeg variasjon. Dette gir mening hvis du mener at alle folliklene som eggene ble aspirert fikk den samme dosen av medisiner i blodet. Selv folliklene reagerte annerledes enn denne medisinen. Noen målte 13 mm og rundt 21 mm. Grunnen til at noen follikler, egg osv responderte riktig og upassende kan gi oss litt innsikt i at noen egg aldri var ment å være eggulert eller skape en graviditet. Embryologien er fortsatt ikke reparativ, bare næring av det du allerede har. 20 egg vil sannsynligvis ikke oversette til 20 embryo, blastocytter eller spedbarn, selv med en fruktbar eggdonor. Hvert laboratorium har et definert optimalt vindu for denne vurderingen og det oppstår vanligvis om morgenen etter innhentingen. embryologen ser på embryoene med et høyt drevet mikroskop for å se om normal befruktning skjedde. Dette kan bestemmes ved å sørge for at vi ser 2 pronuclei i dine embryoer. En pronuclei er det moderlige bidraget til embryoet og den andre pronuclei er den farlige komponenten (den andre kopien utvises fra cytoplasmen i form av en polar kropp). Embryos som utviser unormal befruktning blir kastet og vanligvis bare embryoene som utviser normal befruktning er plassert i kulturretter med friske medier som har alt de trenger å vokse og plassert tilbake i inkubatorene resten av dagen og natten etter evaluering.

Unormal befruktning:

Embryo vekst vurderinger – dag 2 til dag 4

Hvert laboratorium har sine egne systemer basert på media og utstyr som brukes som bestemmer hvor ofte og når evalueringer gjøres. Noen laboratorier skifter media hver 48 timer og vurderer daglig mens noen labs kultur gjennom uten vurderinger til dag 5. Andre faktorer som kan påvirke antallet og når vurderinger utføres er antall embryoer, dag for embryooverføring og om klinikken utfører friske eller frosne overføringer. Vekstvurderinger kan gi to funksjoner. De kan brukes til å endre medier (og næringsstoffer) og til å evaluere de første stadiene av utvikling i laboratoriet. Embryos på dag 2 varierer ideelt fra 2 til 4 celler og har en lav grad av fragmentering, balansert cellesymmetri og en total kvalitetsbeskrivelse. Fragmentasjon er bleking av ekstracellulært materiale fra blastometerene, cellene som sminker embryoet på dette stadium.

Ingen er 100% sikker på hva som forårsaker et embryo å fragmentere, men det er en prognostisk indikator. Det betyr at embryoer som har en høy grad av fragmentering har en redusert sjanse for implantasjon.²

Det betyr ikke om et embryo er fragmentert vil det ikke implantatere og resultere i et sunt svangerskap og foster eller at hvis du overfører et embryo med en lav grad av fragmentering som det alltid vil resultere i suksess. Funksjonen til fragmenteringsvurderingen er for informasjon om behandlingssyklusen, laboratoriekvalitetskontrollen og hvordan pasientens celler reagerer på laboratoriemiljøet. Embryologer vurderer også cellesymmetri under sin vekstvurdering. Symmetry er en indikator på at hver cellegruppe deler seg. For eksempel, hvis du har et trecellers asymmetrisk embryo, kanskje en av de to cellene spaltet, men den andre ikke og vises som en stor celle. Et asymmetrisk embryo har også en redusert prognose. Den totale embryokvaliteten til et embryo har blitt standardisert av Society of Assisted Reproduktiv Technology (SART.org).^[3,5]

Embryo fragmentering:

Embryo-klassifisering:

Et typisk utseende av embryoer i mikroskopet ser slik ut:

Som du kan se ovenfor – det er mange forskjellige embryoer i forskjellige stadier med ulike grader av fragmentering, symmetri og kvalitet. Embryologer bruker disse parametrene for å velge embryoene med den beste prognosen for graviditet. Du kan også være interessert i å lese: Den gode, den dårlige og babyen maker – Embryo kvalitet – Grading Systems

Forberedelse til embryooverføringen – dag 5 (men gjelder også for dag 2 eller dag 3 overføringer)

På dagen for din planlagte embryooverføring vil embryologen vurdere alle embryoene dine. De vurderer alle embryoene dine individuelt for attributter som har vist seg å være knyttet til høyere implantasjonspotensial. Disse egenskapene er forskjellige for ulike utviklingsstadier.

Vi velger det beste du har. Alle menneskers embryoer er forskjellige.

Hvis du har flere embryoer enn klinikaren har godkjent å overføre som har disse positive egenskapene, kan vi anbefale at du kryopreserverer alle supernumerære embryoer. Forventninger kan være svært utfordrende i denne tiden… En fullstendig utvidet eller klekkende blastocyst med en tett pakket indre cellemasse og organisert trofektoderm er et ønsket embryo for overføring. Men om en blastocyst er i tidlige stadier eller klekking kan også avhenge av tidspunktet for retrieval og overføring. Så embryoologen vil velge det beste embryoet som er tilgjengelig for å overføre og ivrig venter på graviditetsprøver også! Å ha ekstra embryoer å fryse eller høy kvalitet embryoer å overføre garanterer ikke suksess og omvendt ikke å ha embryoer å fryse eller dårlig kvalitet embryoer ikke betyr feil, så det er viktig å prøve å holde et åpent sinn og vente til dine endelige testresultater for neste trinn og planer for fremtiden. Hver spill/embryo er i en annen fase av omsorg på en gitt dag. Noen pasienter har egg og sperm hentet og noen pasienter har embryoer overført og det er kultur stadier overalt i mellom. Planlegging, kommunikasjon og systemer for å lette fremstilling og behandling av de varierte pasientene er kritisk.

Mesteparten av hva embryologer gjør er avhengig av tidsplaner og timing. Mange protokoller har optimale intervaller og vi kan ikke dra hjem når klokken sjimmer. Vi går hjem når arbeidet er gjort og alt er klart for neste dag.

Fordi det vi gjør krever forberedelse, kan en enzymatisk endring være forstyrrende for strømmen. Det er nyttig for deg å være i tide for din avtale, følg instruksjoner og bli forberedt. Prøv å være tålmodig mens du venter på telefonoppdateringer og embryologi informasjon. Vi tar vare på embryoene dine, behandler spillene dine og de venter ikke på telefonsamtaler eller aksepterer unnskyldning. Vi vet at du venter på å høre oppdateringer og høre om din fremgang. En god embryolog har utmerket tekniske ferdigheter og er en svært organisert og detaljert orientert person. Dette feltet krever omfattende dokumentasjon og protokollutvikling. En person som har utmerket hånd øye koordinering og en egnethet til papirarbeid er en god passform. Å være en morgenperson er også gunstig som mye av arbeidet vårt er fullført før solen til og med stiger. Vi må være organisert og jobbe godt under press.

Embryo-klassifisering:

Den embryologiske stemmen på rollen som IVF-labb i behandlingsprosessen, av Ashley Wong

Jeg håper å gi deg en introfertilitetsspråk og embryologi gir deg komfort under en svært stressende reise. De profesjonelle i embryologi laboratoriet er ofte hardt i arbeid å sikre at alt er optimalt før, under og etter syklusen for å hjelpe deg å bygge familien din. Vi bistår klinikerne ved å gi dem referanseinformasjon, vurderinger og informasjon som de vurderer når de lager behandlingsplaner og protokoller. Vi er dedikerte individer som liker \”babysitting\” små celler og påvirkes av dine historier og reiser!

Denne jobben er ikke enkel. Vi tilbringer lange timer i et lite og ofte mørkt rom uten mat eller drikke i timer. Vi blir til arbeidet er ferdig. Våre timer er avhengige av når pasientene får sitt utløserskudd og våre personlige liv er helt avhengige av vår profesjonelle tidsplan. Vi møter ofte ikke eller snakker med andre pasienter enn identifikasjonskontroller og embryooppdateringer.

Jeg valgte dette feltet fordi jeg er motivert til å bygge familier og gi pasienter kjærlighet og glede familien min bringer meg! Familier vokser på mange forskjellige måter slik at infertilitetsreisen en pasient går kan være veldig annerledes! Hver pasient kommer til oss med et annet medisinsk, etisk, religiøst og personlig sett faktorer som de ønsker å vurdere. Vi gjør vårt beste for å ære hvem de er som person, par (om nødvendig) og pasient. Jeg er veldig stolt av å ta vare på deres dyrebare små embryoer og ta ansvaret svært alvorlig.

Jeg ser også på meg selv som deres «første barnevakt» på mange måter. For eksempel spiller vi musikk i laboratoriet og snakker ofte med spill som de kan høre oss.

Pasienter som bruker spesielle sokker, tar med seg informasjonskapsler/behandlinger og rivende \”å være\” pappa har alltid en innvirkning på meg. Jeg ser etter fødselsannonser og feriekort fra pasientene og føler en følelse av stor stolthet for å se familiene deres vokse. Jeg elsker å møte noen av barnas lagkamerater og venner som jeg vet jeg hjalp til med å vokse og se dem sine første dager på denne planeten.

Jeg har sett mirakler som har styrket min tro og tap som har utfordret den. Jeg har feiret med tusener og grått med noen også.

Jeg har deltatt i omsorgen av tusenvis av pasienter, men noen spesielle tilfeller vil alltid skille seg ut og har rørt hjertet mitt. En sak som virkelig hadde en innvirkning på meg var en person som tilbrakte mange timer, i mange år, å delta i barnas liv og hengi mye av dem til deres utvikling og talent. Denne personen hadde en søsken som ble påvirket av infertilitet og de søkte ut vår klinikken for behandling. Jeg var så emosjonell over deres omsorg. I dag skriver jeg om det. Jeg ønsket å gi det paret og deres familie samme engasjement, intensitet av ferdighet og hengivenhet til deres tilfelle som deres søsken hadde gitt familien min. Jeg ønsket så dårlig å gi dem glede og kjærlighet som jeg mottar fra å se barna mine utvikle seg! På deres embryooverføring fortalte jeg at jeg visste at deres søsken og etter at jeg forlot rommet ble så emosjonelt at jeg trengte et minutt for å samle min komposur før jeg utførte den tekniske prosedyren for å forberede deres små embryoer til overføring. De hadde suksess i deres behandling, og jeg føler meg så glad for å ha vært en del av det, og å ha tilbakebetalt ånden og energien som er gitt til meg og min familie! En annen pasienthistorie som hadde en annen innvirkning på meg skjedde på en nabofest for mange år siden der verten trakk meg til side i et privat rom. Jeg visste hun var foreldre til et adoptert barn fordi barnet hennes var lik et av barna mine og jeg så henne ofte på skolens funksjoner. I det private rommet hun trakk ut det embryobildet hun fikk ved overføring. Jeg husker umiddelbart at hun ikke hadde lykkes og var bekymret for hvor samtalen kunne gå. Hun uttrykte raskt takknemlighet og takket meg for min rolle i hennes reise og for bildet. Da jeg uttrykte forvirring om takknemligheten for bildet forklarte hun at bildet ga henne noe konkret å sørge. Hun sa hun trengte å sørge over tanken om å bære et svangerskap og et biologisk barn. Etter at hun hadde sluppet den veien i sin reise, kunne hun forfølge en ny vei som inkluderte internasjonal adopsjon. Denne nye veien førte til slutt til at hun ble mor og hadde en familie. Denne kvinnen i sin tur har hjulpet meg med å være mange feil med håp om at hvis ingenting annet, vi ga dem stenging at de prøvde alt de kunne før de gikk på en annen vei eller reise. Som du kan se, spiller embryologi laboratorium en viktig rolle i behandlingsprosessen. Vi jobber hardt bak kulissene som sikrer at folk, miljø, utstyr og forsyninger alle optimaliseres for din suksess. Du kan kanskje ikke alltid se oss, men vi er alltid der med embryoer, historier, håp og drømmer i våre tanker døgnet rundt! The-embryo Koala” bilde

Ressurser:

1. Reviderte minstestandarder for praksis som tilbyr assisterte reproduktive teknologier, Fertilitet og sterilitet Vol. 90, Suppl 3. november 2008 https://www.fertstert.org/article/S0015-0282(08)03722-9/pdf
2. embryo fragmentering in vitro og dets konsekvenser for graviditet og implantasjon, Fertilitet og sterilitet Vol. 71, nr. 5, mai 1999 https://www.fertstert.org/article/S0015-0282(99)00092-8/pdf
3. Standardisering av embryomorfologi, Fertilitet og sterilitet Vol. 94, nr. 3, august 2010 https://www.fertstert.org/article/S0015-0282(10)00856-3/pdf
4. Det forenklede SART embryo-scoring systemet er svært korrelert til implantasjon og levende fødsel i enkelt blastocyst overføringer, J Assist Reprod Genet. 2013 Apr;30(4):563-7, https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3644132/
5. En gjennomgang av samfunnet for assistert reproduktiv teknologi Embryo Grading System og foreslått endring, Integrert J Fertil Steril. 2016 Jul-Sep;10(2):141-7 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4948064/